期刊简介
《中国康复》是科技论文统计源期刊、中国科技核心期刊、是论述全面康复的学术性期刊，旨在加强学术交流，提高我国康复水平，发展我国康复事业，全面介绍国内外康复医学及全面康复的现状、最新成果、新理论、新进展、新方法、新技术，促进学术探讨。
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首页>中国康复杂志
- 杂志名称：中国康复杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部 中国残疾人联合会
- 主办单位：中国残疾人康复协会 华中科技大学同济医学院
- 国际刊号：1001-2001
- 国内刊号：42-1251/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：期刊收录：知网收录(中), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中)
NSE启动子调控的pNSE-IRES2-EGFP-p27双顺反子真核表达载体的构建及表达分析
朱舟；陈华先；徐逸；张强；陈晨；王伟
关键词：启动子, 构建, 靶向性, 真核表达载体
摘要：目的:构建并鉴定带NSE启动子的Flag-p27和EGFP双顺反子真核表达载体pNSE-IRES2-EGFP-p27,转染原代培养的神经元,观察其表达.方法:通过质粒抽提,电泳、酶切、连接、转化等多种基因工程技术,经多步亚克隆后完成能同时表达p27和EGFP基因的神经元特异性表达载体pNSE-IRES2-EGFP-p27;转染体外培养的神经元观察EGFP的表达及通过免疫荧光细胞化学技术观察p27的表达.结果:经酶切和测序鉴定,成功构建真核表达载体pNSE-IRES2-EGFP-p27;转染pNSE-IRES2-EGFP-p27后神经元中可见EGFP的表达,且EGFP阳性细胞中p27表达水平明显增高.结论:NSE启动子能启动目的基因p27和EGFP在神经元的表达,连于Flag-p27的下游EGFP可作为报告基因,指示p27的表达情况.带启动子NSE的Flag-p27和EGFP双顺反子真核表达载体的构建为进一步研究神经元细胞周期与神经系统疾病的关系,并为寻找神经系统疾病的有效基因治疗途径奠定基础.
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