期刊简介
《中国康复》是科技论文统计源期刊、中国科技核心期刊、是论述全面康复的学术性期刊，旨在加强学术交流，提高我国康复水平，发展我国康复事业，全面介绍国内外康复医学及全面康复的现状、最新成果、新理论、新进展、新方法、新技术，促进学术探讨。
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首页>中国康复杂志
- 杂志名称：中国康复杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部 中国残疾人联合会
- 主办单位：中国残疾人康复协会 华中科技大学同济医学院
- 国际刊号：1001-2001
- 国内刊号：42-1251/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：期刊收录：知网收录(中), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中)
解偶联蛋白-2RNA干扰慢病毒载体的构建
万赤丹；程锐；王春友；王宏博；王帅；刘涛
关键词：解偶联蛋白-2, RNA干扰, 慢病毒
摘要：目的:构建解偶联蛋白-2(UCP-2)基因的RNA干扰慢病毒载体.方法:根据RNA干扰序列设计原则,针对UCP-2mRNA(NM_011671)设计3个RNA干扰靶点序列,合成含干扰序列的DNA双链,酶切后连入慢病毒转移质粒pGCL-GFP中.连接产物转化感受态细胞,所获克隆行PCR鉴定和序列测定.构建成功的RNA干扰质粒与UCP-2表达质粒共转染293T细胞,荧光显微镜下观测转染效果,Western blot检测UCP-2蛋白表达,筛选出干扰效果好RNA干扰质粒.将该质粒与两种辅助包装原件载体质粒pHelper 1.0(gag/pol元件)载体,Helper 2.0(VSVG元件)共转染293T细胞包装成慢病毒并检测滴度.结果:PCR和测序结果显示针对3个靶点的RNA干扰质粒均构建成功;通过Western blot检测获得优干扰靶点,并成功包装成滴度为5×108TU/ml的慢病毒.结论:成功构建可供感染的解偶联蛋白-2 RNA干扰慢病毒载体,为后续靶向抑制该基因表达以提高脂肪肝移植成功率的研究莫定物质基础.
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